Ayant trouvé une ancienne croix de templier, un spécialiste de l'histoire de l'art doit faire équipe avec un improbable groupe d'aventuriers pour percer les secrets de la relique.

Le monde est un lieu mystérieux, surtout vu à travers les yeux d'un animal. Sur son chemin, EO, un âne gris aux yeux mélancoliques, rencontre des gens bien et d'autres mauvais, fait l'expérience de la joie et de la peine, et la roue de la fortune transforme tour à tour sa chance en désastre et son désespoir en bonheur inattendu. Mais jamais, à aucun instant, il ne perd son innocence.